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miRNA熒光定量PCR實驗技術服務
  Real-time miRNA是小的非編碼RNAs,通過選擇性的與互補的mRNA或3' UTL序列結合控制著轉錄水平的基因表達。近30%哺乳動物基因受小RNA分子的調控,從而調節各種生物功能,包括發育、細胞分化、增殖、凋亡、維持stemness和impriting。Northern blot是分析各種miRNAs常用的方法,但Northern blot分析的靈敏度低、通量差仍是其主要不足。實時定量PCR由于其靈敏度高、方便快速成為檢測的一個不錯選擇。 
  由于成熟的miRNA僅為21-23nt,不能通過傳統方法進行發轉錄,進而進行定量。信諾金達采用miRNA加尾方法反轉錄miRNA,然后進行miRNA定量(見下圖)。
miRNA熒光定量PCR服務要求
  需提供新鮮或者保存完好的細胞(至少5×10的6次方)、組織(100mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好); 同時提供待測miRNA序列或登錄號。
miRNA熒光定量PCR服務報告內容
  miRNA(或總RNA)濃度,電泳圖片,擴增曲線,熔解曲線,Ct值以及數據統計分析(可選),實驗報告以及剩余引物和模板(信諾金達可保存1個月)
服務編號
服務項目
內容說明
價格
周期
SGSQP06
miRNA SYBR Green I 相對定量
樣品檢測費用
檢測樣品數<20
¥160/樣品•基因
3-4周※
SGSQP07
檢測樣品數≥20
¥120/樣品•基因
SGSNR03
miRNA 提取和逆轉錄
新鮮組織、血液、細胞miRNA提取
¥350/樣品
1-2周

※:一般情況下,3周左右可完成實驗!若遇特殊原因,比如實驗材料降解,需要重新提供樣品或者總RNA需要重新提取;基因表達量較低,需要構建標準品等情況,周期會有所延長。

 

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