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雙熒光素酶檢測
     Luciferase報告基因系統是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統。熒光素酶報告基因實驗(luciferase assay)是檢測轉錄因子和其靶啟動子中的特異順序結合以及miRNA與靶序列結合的重要手段。
    信諾金達主要提供2個方面的熒光素酶驗證:
    啟動子分析實驗: 轉錄因子的DNA結合域和順式作用元件實現共價結合,通過測定兩種熒光素酶的活性比值獲得轉錄因子是否與啟動子結合。
    miRNA與靶標基因的相互驗證:通過測定兩種熒光素酶的活性比值獲得miRNA對靶基因調控作用的結果。
    由于miRNA主要通過作用于靶基因的3’UTR起作用,可以將目的基因3’UTR區域構建至報告基因luciferase的后面, 通過比較過表達或者干擾miRNA后,報告基因表達的改變(監測熒光素酶的活性變化)可以定量反映miRNA對目的基因的抑制作用;結合定點基因突變等方法進一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點。
啟動子分析實驗
客戶提供:
    基因的名稱、細胞株
我們提供:
    1.啟動子預測
    2.啟動子熒光素酶報告載體構建
    3.雙熒光素酶檢測
    4.完整的實驗報告(包含載體構建序列、引物設計、載體圖譜、載體測序報告、雙熒光素酶檢測報告)
miRNA與靶標基因的互作驗證
客戶提供:
    miRNA名稱、靶基因名稱、細胞株
我們提供:
    1.miRNA與靶基因預測
    2.雙熒光素酶報告基因野生型載體構建
    3.雙熒光素酶報告基因突變型載體構建
    4.雙熒光素酶檢測
    5.完整的實驗報告(包含載體構建序列、引物設計、對應靶位點、載體圖譜、載體測序報告、雙熒光素酶檢測報告)
啟動子載體圖譜和熒光素酶作用原理

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相關鏈接:雙熒光素酶報告基因檢測【miRNA對靶基因調控研究】

 

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